Chin Med：真武汤通过靶向肾-心炎症轴和抑制CCL2/CCR2介导的巨噬细胞活化改善尿毒症性心肌病
2026年4月20日
背景
尿毒症性心肌病是慢性肾脏病尤其是终末期肾病患者常见且不可逆的心血管并发症，以左心室肥厚、心室扩张、心室僵硬度增加及舒张功能不全为特征，严重影响患者生存质量与预后。尽管其发病机制涉及交感神经激活、肾素-血管紧张素-醛固酮系统过度活化、炎症、氧化应激及尿毒症毒素蓄积等多重因素，但目前仍缺乏针对性的有效治疗手段。源自《伤寒论》的经典方剂真武汤，由茯苓、白芍、附子、生姜、白术五味药组成，传统用于温阳利水，近年来研究提示其对心肾疾病具有保护作用，但其调控心肾相互作用的系统性机制尚不明确。本研究首次系统揭示了真武汤通过靶向肾-心炎症轴、抑制CCL2/CCR2介导的巨噬细胞活化，发挥心肾双重保护作用的分子机制。研究采用5/6肾切除手术构建尿毒症性心肌病小鼠模型，术后给予真武汤（5 g/kg/d和10 g/kg/d）连续治疗8周。结果显示，真武汤可剂量依赖性地降低血清尿素氮和肌酐水平，减轻肾小管扩张及肾间质纤维化，下调肾损伤标志物Kim1及纤维化相关基因Col1a1和Col3a1的表达，并减少F4/80阳性炎症细胞浸润及M1型巨噬细胞标志物iNOS和CD86的表达。在心脏方面，真武汤显著减轻心肌细胞肥大，降低心重/体重比，改善心功能，提升射血分数、短轴缩短率及心输出量，并下调心房利钠肽和B型脑钠肽的表达。以上结果表明，真武汤在尿毒症性心肌病模型中兼具明确的肾脏保护与心脏保护作用。为深入阐明其作用机制，研究采用Olink蛋白组学技术分析血浆蛋白谱。主成分分析显示真武汤可显著逆转5/6肾切除诱导的血浆蛋白异常变化，尤其对白细胞介素-6、白细胞介素-1β、趋化因子配体1、转化生长因子-α及趋化因子配体2等炎症相关细胞因子具有明显回调作用。基因本体论富集分析提示，真武汤调控的细胞因子主要参与细胞凋亡与炎症反应，分子功能富集分析进一步指向趋化因子信号通路。ELISA验证结果显示，真武汤可显著降低模型小鼠血清中CCL2、IL-1β和IL-6的水平，提示其通过调控趋化因子介导的炎症反应发挥治疗作用。在成分分析方面，研究采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术对真武汤中的主要成分及入血成分进行定性分析。共鉴定出45种主要化合物，其中34种成分可入血。在此基础上，研究进一步筛选出16种入血原型成分，并选取其中与炎症及趋化因子调控密切相关的苯甲酰乌头宁、芍药苷和白术内酯III进行机制验证。在TNFα诱导的HK-2肾小管上皮细胞损伤模型中，上述三种成分均能显著抑制CCL2、CCL3、CCL5、CCL20及CXCL1等趋化因子的转录表达，且三者联合应用表现出协同抑制作用。同时，这些成分可有效缓解TNFα诱导的氧化应激和细胞凋亡，下调Bcl-2表达，上调Bax和Cleaved-Caspase 3表达，显示出多重细胞保护作用。为明确真武汤抑制趋化因子产生的上游机制，研究结合网络药理学预测与实验验证。KEGG富集分析提示NF-κB信号通路是潜在关键通路。Western blot结果显示，苯甲酰乌头宁、芍药苷和白术内酯III可显著抑制TNFα诱导的NF-κB p65磷酸化，在体内模型中亦可抑制肾脏组织中p65磷酸化及IκBα和IKKβ的降解。分子对接进一步提示上述成分与IKKβ、GSK3β等NF-κB通路关键激酶具有稳定结合能力，为其抑制作用提供了结构基础。为验证真武汤通过调控肾-巨噬细胞-心轴发挥保护作用，研究构建了HK-2肾小管上皮细胞、THP-1巨噬细胞与AC16心肌细胞的三步共培养体系。结果显示，经真武汤活性成分处理的HK-2细胞上清可显著减少巨噬细胞向M1型极化，降低iNOS和CD86表达，并减少巨噬细胞分泌IL-1β和IL-6。该效应在巨噬细胞经CCR2拮抗剂预处理后消失，说明其依赖于CCR2信号通路。进一步，将该巨噬细胞上清用于AC16心肌细胞培养后，心肌细胞中NPPA、NPPB和MYH7等肥大相关标志物表达显著下降，提示真武汤通过抑制肾源性趋化因子诱导的巨噬细胞炎症反应，间接减轻心肌细胞损伤与肥大。为进一步确证CCL2在真武汤治疗效应中的关键地位，研究在尿毒症性心肌病小鼠中给予CCL2中和抗体干预。结果显示，CCL2中和抗体可显著降低血清IL-1β水平，减轻肾组织损伤与纤维化，减少肾内M1型巨噬细胞浸润，下调Kim1、Tnfa、Col1a1和Col3a1表达，同时改善心脏结构异常、降低心肌细胞横截面积、恢复射血分数与短轴缩短率，整体保护效应与真武汤高度相似，提示CCL2/CCR2轴是真武汤发挥心肾保护作用的核心通路。综上，本研究系统阐明了真武汤通过抑制肾小管上皮细胞中NF-κB介导的CCL2表达，减少CCR2阳性巨噬细胞招募与M1型极化，从而减轻系统性炎症反应，最终缓解心肌细胞肥大与功能障碍的分子机制。研究不仅揭示了真武汤“心肾同治”的科学内涵，也为尿毒症性心肌病及心肾综合征的临床干预提供了新的治疗靶点与理论依据。老中医（微信号：wxid_rszr95aw79ie22）
