背景

急性脑梗死（ACI）具有致残率和复发率高的特点，对公众健康构成重大威胁。近年来，正如最新指南所反映的那样，在理解ACI的病理生理机制、诊断和治疗方面取得了重大进展。然而，局限性依然存在。因此，ACI和蛋白质组学的研究受到了相当大的关注。血液样本易于获取，含有在血脑屏障受损时进入循环的脑相关蛋白，被认为是识别中风生物标志物的最佳选择。
由国医大师任继学研制的川红中风（CHZF）胶囊已被临床证明可以促进脑梗死患者的神经功能恢复，降低致残率，改善长期预后，因其安全性和最小的副作用而得到广泛认可。然而，由于CHZF胶囊作为一种复方中药制剂的复杂性，尽管其具有多靶点和多途径的特点，但其确切的靶点和潜在的作用机制仍有待阐明。
目的
阐明CHZF胶囊治疗急性脑梗死和改善长期预后的潜在靶点，从而为未来中药化合物在急性脑梗死预防和治疗中的研究提供方向。
图片
方法
该研究重点鉴定接受CHZF胶囊治疗的ACI患者中独特的差异蛋白。20名急性脑梗死患者根据CHZF胶囊的给药情况分为药物组（CHZ）和对照组（DZZ）。使用4D无标记蛋白质组定量技术进行质谱分析，以鉴定组间的差异蛋白质。进行了功能富集分析，包括基因本体论（GO）分类和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路分析，以确定与差异蛋白质相关的富集趋势。
基于富集分析的P值，采用层次聚类方法识别各组中富集的相关途径。STRING（v.11.5）蛋白质相互作用网络数据库用于获得差异蛋白质相互作用、相应的靶蛋白和主要相关途径。随后应用平行反应监测（PRM）来验证所选的靶蛋白。最后，绘制了弦图和ROC曲线进行可视化和分析。
结果
质谱分析鉴定出1400种蛋白质，其中1360种具有定量可比性。使用P值<0.05，显著上调的变化阈值>1.5，显著下调的变化阈值<1/1.5，鉴定出63种差异蛋白（27种上调，36种下调）。聚类分析显示，Q4（>2.0）与补体和凝血级联途径（hsp04610）最密切相关。
通过PRM实验验证了参与急性炎症反应和免疫过程的六种蛋白质：补体因子H相关蛋白（CFHR）4、甘露糖结合凝集素蛋白（MBL）2、Orosomucoid（ORM）1、ORM2、血管非炎症因子（VNN）1和人类白细胞抗原（HLA）-A。Chord图和ROC曲线分析表明，生物标志物的敏感性顺序如下：CFHR4>MBL2>VNN1>ORM1=ORM2>HLA-A。
结论
ACI患者这六种蛋白的变化可作为长期预后的指标。补体和凝血级联途径与ACI的发展密切相关。这些发现为预防急性脑梗塞复发提供了依据，并有助于开发中西医结合治疗急性脑梗塞的方法。

 

来源｜中医科新前沿
作者｜梅斯医学
编辑 | 逅思