诸多证据揭示，传统中药展现出治疗T2DM及其并发症的潜力。中药以其多样化的干预手段和生物活性成分的协同效应，展现出显著优势，从而在临床应用中提升了多方面的治疗效果。交泰丸（JTW）在预防和治疗T2DM相关并发症方面具有显著疗效。然而，其分子机制及有效化合物尚未完全明了。
近日，一篇名为“Network pharmacology analysis revealed the mechanism and active compounds of jiao tai wan in the treatment of type 2 diabetes mellitus via SRC/PI3K/AKT signaling”的文章探究了JTW治疗T2DM的作用机制。
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JTW给药可改善T2DM的代谢控制
首先，研究构建了T2DM模型，并对血液指标进行了评估。结果显示，JTW治疗引起了大鼠体重及肝脏系数的变化（图2A-B）。值得注意的是，通过HOMA-IR指数的量化分析，JTW导致了空腹血糖水平、空腹胰岛素水平及胰岛素抵抗的降低（图2C-E），而HOMA-ISI水平显著升高（图2F）。与模型组相比，JTW组的OGTT（AUC）和ITT（AUC）水平显著降低（图2G-J）。通过评估ALT和AST活性，提示肝细胞损伤。给予JTW显著降低了AST和ALT活性（图2K-l）。SOD和MDA被用来揭示肝脏中的氧化应激水平。JTW显著降低了MDA水平，提高了SOD水平（图2M-N）。肝组织HE染色显示，与模型组相比，JTW给药改善了肝脏形态，炎症和坏死减少（图2O）。
SRC作为一种酪氨酸蛋白激酶，能够通过调节AKT的磷酸化来激活PI3K/AKT信号通路。pi3-激酶是SRC的优先底物。PI3K/AKT信号通路是一种典型的胰岛素信号通路，它促进葡萄糖代谢，抑制肝糖异生，这一调控在糖脂代谢相关过程的管理中发挥着关键作用。
因此，JTW可能通过SRC介导的PI3K/AKT信号通路调节肝脏代谢。在研究中，模型组的p-SRC/SRC明显高于对照组。相反，在经JTW处理的小鼠的肝脏中，这一比例显著降低（图2P-Q）。同时，JTW处理后，p-AKT/AKT水平随着PI3K和p-PI3K水平的升高而显著升高（图2P，2R-T）。
图2 JTW对T2DM模型大鼠的影响
JTW通过SRC/PI3K/AKT信号通路保护葡萄糖胺诱导的HEPG2细胞胰岛素抵抗
经过观察，相较于对照组，5%及10%的浓度对细胞活力并无显著影响。基于此，研究决定采用这些浓度进行深入的葡萄糖消耗实验，并最终确定10%的血清浓度将用于后续的检测。CCK-8实验结果显示，在20mmol/L葡萄糖胺的诱导下，经JTW或MET处理后，HepG2细胞的活力未见明显下降（图3A）。为进一步阐释JTW的抗胰岛素抵抗作用，研究利用葡萄糖氧化酶法评估了葡萄糖消耗量。葡萄糖消耗试验结果显示，与正常组相比，20mM葡萄糖胺诱导的模型组细胞的葡萄糖消耗率显著降低（p<0.01）。然而，JTW治疗后，此情况得到了改善（图3B）。此外，JTW的补充显著提升了SOD水平，同时降低了MDA水平（图3C-D）。
为探究JTW对葡萄糖代谢过程的影响机制，研究在葡萄糖胺诱导的HepG2细胞中检测了p-SRC、SRC、PI3K、AKT和p-AKT的蛋白表达。结果显示，JTW上调了葡萄糖胺诱导的HepG2细胞中PI3K、p-PI3K和p-AKT/AKT的蛋白表达水平，而下调了p-SRC/SRC的蛋白表达水平（图3J）。
为了进一步了解SRC的功能，研究通过转染SRC-siRNA，降低葡萄糖消耗，在HepG2细胞中成功敲除SRC（图3E-F）。同时，与si-SRC组相比，JTW+si-SRC组的葡萄糖消耗量增加（图3I）。且ROS和过氧化氢水平在20 mM葡萄糖胺处理后显著增加，而JTW预处理后显著降低（图3G-H）。然而，在敲除SRC后，这种保护作用显著降低（图3G-H）。在葡萄糖胺诱导的HepG2细胞和JTW处理下，PI3K、p-PI3K和pAKT/AKT蛋白水平下调（p<0.05）。相比之下，经过si-SRC处理后，其保护作用减弱(图3J-M）。结果表明，JTW可通过SRC/PI3K/AKT信号通路显著缓解葡萄糖胺诱导的HepG2细胞的胰岛素抵抗。
图3 JTW对IR-HepG2细胞的影响
JTW治疗T2DM的潜在治疗靶点
该研究通过对比JTW的药物靶基因与疾病靶基因，成功筛选出521个共有基因（图4B）。随后，访问字符串数据库，并从共有基因列表中挑选出“多个蛋白质”。在设置中选择“隐藏断开的节点”，并设定“最高置信度（0.9）”以生成蛋白质相互作用网络图，该图揭示了JTW治疗T2DM的关键靶点（图4C）。最终，确定了核心靶点Akt1。将含有蛋白质相互作用数据的CSV文件从字符串数据库导入至Cytoscape 3.8.2软件。利用Cytohubba插件构建了一个蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络。这些关键靶点的确定有助于加强对不同类别T2DM的治疗效果。最终，在网络中对这些靶点进行了可视化展示，并列出了前10位基因，包括SRC、PIK3R1、GRB2、HSP90AA1、STAT3、MAPK3、MAPK1、PIK3CA、Akt1、CTNNB1（图4D-E）。
图4 JTW与T2DM相互作用网络核心基因的筛选
结论
总之，该研究通过对JTW作用机制的深入理解及其对T2DM治疗效果的阐释，为JTW的临床应用提供了坚实的理论与实验依据。
